Pesquisa bacteriológica: algoritmo, metodologia, objetivos, etapas

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Pesquisa bacteriológica: algoritmo, metodologia, objetivos, etapas
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Anonim

O que é pesquisa bacteriológica? De acordo com que esquema é realizado? O que se entende por segurança neste caso? Quais são os objetivos e etapas da pesquisa bacteriológica?

Informações gerais

exame bacteriológico
exame bacteriológico

O exame bacteriológico é um processo científico no qual as bactérias são identificadas e suas propriedades são estudadas para fazer um diagnóstico microbiológico. De grande importância aqui é a determinação do tipo ou espécie do microrganismo resultante (cultura pura está implícita). Isso é acompanhado pelo estudo das propriedades bioquímicas e fisiológicas dos organismos, bem como a tendência à formação de toxinas. Para estes fins, são utilizadas as reações de precipitação e aglutinação. Também é praticado para infectar animais de laboratório com detecção subsequente de alterações patológicas.

Trabalhando com material de teste

algoritmo de pesquisa bacteriológica
algoritmo de pesquisa bacteriológica

O algoritmo do estudo bacteriológico prevê a estrita adesão a instruções especiais. Assim, o material de teste deve ser coletado em placas estéreis sob condições assépticas. Também é preciso cuidarpara garantir a entrega ao laboratório o mais rápido possível. O armazenamento a frio de amostras é desejável. A técnica de pesquisa bacteriológica prevê muitas situações possíveis. Assim, o tipo de objeto, as propriedades do microrganismo e a natureza da doença muitas vezes tornam necessário desenvolver instruções individuais para o trabalho. Um grande número de métodos diferentes são usados no trabalho. Um dos mais comuns é a bacterioscopia. Mas se as bactérias não forem fixadas, uma gota esmagada ou pendurada será usada. Note-se que as duas últimas opções são caracterizadas por um aumento do nível de contágio.

Bacterioscopia

Neste caso, são usados traços. Para criá-los, você precisa distribuir uma gota do líquido que está sendo estudado sobre a superfície de uma lâmina de vidro. Zates deve secá-lo. Isso geralmente é feito movendo a droga através de uma chama obtida de um queimador de gás. Embora os compostos de fixação possam ser usados como alternativa. Para indicar que as ações preparatórias foram realizadas com esta preparação, ela é manchada. O objetivo de tal manipulação é a precisão, que é muito importante quando o exame microscópico e bacteriológico é realizado. Afinal, se você reutilizar o medicamento para outra finalidade, obterá mingau, com o qual será muito difícil trabalhar com eficácia.

Por que a bacterioscopia é tão popular

etapas da pesquisa bacteriológica
etapas da pesquisa bacteriológica

Não menos importante devido à disponibilidade deste método. Se for realizado um estudo bacteriológico de uma preparação fresca, para determinar o patógenoreações microquímicas ou coloração seletiva de várias partes estruturais do microrganismo podem ser usadas. Qual é o melhor? Um resultado mais preciso pode ser obtido ao trabalhar com uma preparação colorida. Neste caso, o material de teste é aplicado a uma lâmina de vidro pré-preparada. E certifique-se de fina (e se possível mesmo) camada. Depois disso, você deve esperar até que a droga seque no ar. Os microorganismos são então fixados usando um dos métodos convencionais. Depois disso, a preparação resfriada é submetida a coloração com tinta diferencial ou simples. Para isso, podem ser utilizadas preparações secas e nativas. Depois disso, resta direcionar os raios ultravioleta ou azuis curtos para o local de acúmulo de organismos, o que faz com que todo o micróbio ou certas partes de seu corpo brilhem.

Aplicação prática da bacterioscopia

É usado para diagnosticar uma série de doenças infecciosas. As mais famosas são a tuberculose, a gonorreia e a febre recorrente. Além disso, recorrem à pesquisa para estudar todo o complexo da microflora de um órgão ou produto. Mas os críticos muitas vezes apontam para a relativa f alta de confiabilidade e imprecisão desse método.

Culturas e subculturas de culturas bacterianas

Objetivos da pesquisa bacteriológica
Objetivos da pesquisa bacteriológica

Realize-os com uma pipeta Pasteur. A realização de exames bacteriológicos e citológicos é muitas vezes difícil de realizar sem inoculação e subcultura durante o fluxo de trabalho. Ao trabalhar com uma pipeta Pasteur, sua pontaromper com uma pinça. A própria ferramenta é então transportada através da chama do queimador e depois deixada esfriar. By the way, ambos os meios nutrientes líquidos e sólidos podem ser usados para semear. A escolha é influenciada por quais objetivos da pesquisa bacteriológica são perseguidos. Ao mesmo tempo, é necessário aderir ao algoritmo de trabalho e precauções de segurança. Portanto, ao trabalhar com um meio nutriente líquido, é necessário garantir que ele não derrame e não molhe as bordas da cortiça e dos tubos de ensaio. Quando o estudo é realizado com material sólido, muitas vezes é usada uma agulha especial para entrar na cultura. Ao realizar a semeadura e a ressemeadura, devem ser realizadas próximo à chama de um queimador de gás. Para a pureza do experimento, o tubo de ensaio não deve permanecer aberto por muito tempo. Quanto à ferramenta com cultura: você deve se certificar de que ela não toca em nada. Além disso, a técnica de pesquisa bacteriológica prevê queimar as bordas do tubo de ensaio antes de fechá-lo. Um produto acabado deve ser assinado imediatamente após a produção para evitar futuras confusões.

Eficiência de semeadura

técnica de exame bacteriológico
técnica de exame bacteriológico

Acredita-se que este método permite obter dados mais precisos e confiáveis durante o diagnóstico bacteriológico do que a bacterioscopia anteriormente considerada. Neste caso, o algoritmo de ações é o seguinte:

  1. Inicialmente, uma cultura pura é espalhada sobre a superfície do meio nutriente, que é despejada em uma placa de Petri.
  2. A semeadura inicial deve ser feita em condições favoráveis para a espéciemicroorganismos.
  3. Depois de um ou dois dias, na presença de um ambiente ideal, todas as colónias adequadas deslocam-se para onde possam desenvolver-se ao máximo. Isso os libera, portanto, da microflora estranha.

O resultado final é uma cultura de bactérias homogêneas que podem ser identificadas.

Culturas puras

Mas como eles são feitos? Para isso, são utilizados métodos biológicos e mecânicos. No primeiro caso, um grande papel é desempenhado pelos meios nutrientes, onde existem condições necessárias favoráveis para o desenvolvimento de uma determinada cultura. Uma abordagem também pode ser usada quando animais de laboratório suscetíveis a um tipo específico de bactéria são infectados. Os métodos mecânicos baseiam-se na utilização de um instrumento estéril, com o qual a cultura é colocada em meio nutriente localizado na primeira, segunda e terceira placas de Petri. Então é necessário esperar até que as colônias individuais cresçam, e uma cultura pura já se destacará delas. As bactérias também podem ser cultivadas em termostatos especiais, onde a temperatura é mantida em um determinado nível (geralmente cerca de 37 graus). Neste caso, o processo continua por cerca de um dia. Mas, dependendo do tipo de microrganismo, outros termos podem ser estabelecidos. Também importante é a presença da concentração necessária de oxigênio. Para fazer isso, use vários métodos de aeração. Até agora, falamos sobre a situação como um todo e em geral, mas agora vamos focar nossa atenção no que é o esquema da pesquisa bacteriológica.

Prática

esquemapesquisa bacteriológica
esquemapesquisa bacteriológica

Um conjunto de métodos é frequentemente usado para detectar microorganismos patogênicos no corpo de um paciente ou potencial portador. Os materiais e métodos utilizados dependem dos objetivos da análise, bem como das condições do ambiente em que o trabalho é realizado. Na prática, na maioria das vezes as bactérias são detectadas através de hemoculturas retiradas de uma pessoa ou animal. Se as lesões locais estiverem bem definidas, os patógenos podem ser pesquisados em áreas problemáticas. Isso é típico para doenças como disenteria, gonorreia, difteria e várias outras semelhantes. Em casos especialmente graves, esse processo é dividido em etapas separadas de exame bacteriológico (o que é típico da febre tifóide). Cada um deles usa seus próprios métodos, que visam encontrar a causa da infecção. Vamos dar uma olhada mais de perto na situação da febre tifóide. Na primeira semana da doença, a maneira mais confiável de diagnosticar a doença são as hemoculturas. No segundo, um estudo sorológico é considerado como tal. Na terceira semana, as fezes são examinadas. O último método é considerado a verificação de convalescentes.

Identificação de microrganismos

Começa com o processo de tingimento. Em seguida, eles observam como a bactéria pode decompor carboidratos, aminoácidos e assim por diante. Além disso, esse processo pode ser complementado pelo estudo de outras propriedades que cada gênero individual ou espécie de microrganismo possui. Como exemplo, devem ser dadas as possibilidades de dissolução de eritrócitos de vários animais, o efeito na coagulação do plasma sanguíneo e na dissolução do coágulo.fibrina e assim por diante. Tudo isso são as características diferenciais dos representantes individuais do micromundo. Além disso, a identificação sorológica pode ser usada para o reconhecimento final (mas isso geralmente diz respeito a bactérias patogênicas que pertencem à família intestinal).

Conclusão

exame microscópico e bacteriológico
exame microscópico e bacteriológico

Deve-se notar que vários microrganismos não podem ser identificados pelos métodos descritos no artigo. Nesse caso, a prática de infectar animais de laboratório é amplamente utilizada. O cálculo é feito no fato de que a toxigenicidade ou patogenicidade característica aparecerá, o que não é observado em condições artificiais. A infecção também pode ser usada como um método para o acúmulo de micróbios patogênicos. E já quando as características da cultura estudada, encontradas no processo de estudo das propriedades biológicas, morfológicas, sorológicas e bioquímicas, são comparadas, podemos dizer que se sabe com que tipo de micróbios estamos lidando. Identificação significa uma indicação do gênero, espécie e tipo de bactéria. Se o microrganismo em estudo se desviar em certas propriedades de sua característica típica, isso deve ser indicado. Vários especialistas acreditam que, em tais casos, será útil reidentificar com duplicação de todos os métodos e técnicas utilizados. Às vezes, a pesquisa pode ser levada para o próximo nível, o que requer uma abordagem mais séria (e mais cara). Se foram obtidos resultados negativos, isso indica que a preparaçãomicrorganismos estavam ausentes ou não eram viáveis. Mas para a precisão da pesquisa, se houver suspeita de vários portadores de bacilo (disenteria, difteria, febre tifóide), verificações repetidas são mostradas nesses casos. Isso é necessário para que os especialistas tenham uma ideia precisa do que precisam lidar.

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