Segundo as estatísticas da OMS, nos últimos 40 anos, 25 milhões de pessoas morreram de AIDS. O dano desta infecção é enorme. A maioria dos infectados estava na África, de onde veio essa infecção. Com o HIV, o diagnóstico da doença torna-se especialmente relevante. É verdade que ainda não há cura para o HIV, mas o tratamento precoce pode prolongar a vida do paciente e melhorar sua qualidade.
Diagnóstico da infecção pelo HIV
A infecção pelo HIV é determinada em diferentes estágios pelos seguintes métodos:
- ELISA - imunoensaio enzimático.
- Western blot.
- PCR - reação em cadeia da polimerase.
- Testes rápidos.
O método PCR foi desenvolvido pelo bioquímico americano Kary Mullis, que recebeu o Prêmio Nobel por ele em 1983. Hoje, este método na medicina no diagnóstico de todas as infecções é considerado o líder devido à sua precisão e conteúdo informativo. O HIV não é exceção a esse respeito.
A essência da análise
Qualquer célula viva contém RNA e DNA. Esses ácidos nucleicos são capazes de auto-copiar e auto-replicar. Para cada infecção, os fragmentos de DNA são únicos. NOem fluidos biológicos, esses fragmentos de ácidos nucléicos circulam. Eles são capturados e reconhecidos por equipamentos especiais - o reator. Esta é a base do método. O assistente de laboratório conta esses fragmentos. O retrovírus HIV é monitorado para RNA. Mesmo com cópias únicas de partículas virais, a PCR pode detectá-las e contá-las.
O sangue venoso é mais frequentemente usado como fluido de teste. Os componentes especiais do método se ligam às partículas do vírus e as tornam detectáveis, pois os fragmentos encontrados são multiplicados.
No caso do HIV, o resultado da presença do vírus pode ser obtido muito antes de a clínica aparecer. Portanto, devido à sua alta sensibilidade, a PCR tem um valor diagnóstico tão alto. Uma grande vantagem da PCR é a versatilidade do método. O período de incubação da infecção para PCR não é um obstáculo.
Custo da pesquisa
O método PCR é bastante caro. Essa é uma de suas grandes desvantagens. Requer equipamentos de última geração e assistente de laboratório altamente qualificado. Diante do exposto, os diagnósticos de PCR não são realizados em pequenos povoados. Você pode fazer o teste apenas em grandes clínicas especializadas.
O custo do teste de DNA do HIV nas clínicas de Moscou começa em 2.800 rublos, a carga viral (RNA viral no plasma) é determinada por PCR - a partir de 8.800 rublos e a resistência ao HIV a inibidores de protease - a partir de 16.500 rublos. Como você pode ver, os preços são bastante elevados. A PCR pode ser feita gratuitamente em clínicas públicas sob a política do MHI. Importante,que o procedimento pode ser feito anonimamente. No registro, o paciente recebe um número pelo qual pode saber o resultado. Nos centros médicos modernos existem contas pessoais de clientes onde esses dados serão inseridos.
Objetivos da pesquisa
PCR diagnóstico para HIV é prescrito em tais casos:
- Detecção de infecção em criança nascida de mãe ou portadora doente para determinar infecção intrauterina.
- Se o ELISA deu resultados questionáveis (PCR para HIV ajuda neste caso a fazer um diagnóstico final).
- Para detectar o conteúdo quantitativo do vírus no corpo.
- Com um immunoblot positivo, eles se complementam com PCR.
- Teste de doadores.
- Para diagnóstico precoce do HIV.
- Para determinar a eficácia e resistência ao ART.
A vantagem desta análise é que a PCR para HIV pode ser realizada mesmo em crianças menores de um ano.
As pesquisas geralmente são realizadas não para diagnóstico primário, mas já em processo de tratamento. Os diagnósticos primários são estudos sorológicos (determinam o nível de anticorpos contra o HIV). Se um resultado falso-positivo for repetido, isso pode ser com uma carga viral baixa.
PCR diagnostica o HIV quando ainda não há anticorpos para ele. O método ELISA neste caso não dará uma resposta.
E PCR para HIV já será positivo. Mas os sintomas deste período de HIV são inespecíficos. O paciente é tratado pela primeira vez por um longo tempo e sem sucesso para ARVI por um clínico geral. Deve-se ter em mente que o diagnóstico do HIV é baseado apenas naPCR não é colocado, é necessário passar por outros testes abrangentes. O método PCR é mais frequentemente auxiliar para casos difíceis.
Preparando para análise
Antes de fazer PCR para HIV, 2 dias antes do teste, não deve comer alimentos gordurosos, álcool. Também é melhor não se esforçar mental e fisicamente. Se o paciente receber um curso de imunoestimulação, ele é interrompido 2 semanas antes da análise.
O sangue é melhor colhido pela manhã. Outros fluidos biológicos do corpo (esperma, secreção vaginal) também podem ser examinados, mas o sangue é o melhor material. Saliva, suor, urina e lágrimas não são usados, pois o conteúdo do vírus neles é mínimo.
Prósias da PCR para HIV
As vantagens do método são a baixíssima probabilidade de um resultado falso positivo, a universalidade da reação para quaisquer fluidos biológicos do corpo. A análise tem uma ampla gama:
- Uma coleta de sangue pode ser usada para detectar diferentes infecções.
- A técnica é urgente, o resultado fica pronto no dia seguinte.
- Confiança está entre 85 e 98%.
- A presença do HIV pode ser determinada 10-14 dias após a infecção (ainda não há anticorpos).
- Sem limite de idade, pode ser realizado desde o nascimento.
Contras do método
As desvantagens da PCR são as seguintes:
- Custo da análise.
- Requer equipamento médico sofisticado.
- Requer assistente de laboratório e médico altamente qualificados,análise do tomador.
- A reação é altamente sensível, então o erro pode ser de 20%.
- Pode resultar em um resultado falso positivo se o paciente tiver processos autoimunes, oncologia, infecções crônicas.
- É necessária uma limpeza especial das instalações do laboratório, pois o vírus pode entrar na análise pelo ar. Então o resultado estará errado.
Para laboratórios que realizam PCR, para melhorar a qualidade dos diagnósticos, medidas especiais e rigorosas foram desenvolvidas de acordo com o sistema SanPiN de controle interno. Além disso, todas as regras de trabalho com esta técnica devem ser observadas:
- Obrigatório seguir rigorosamente as informações nos tubos de ensaio.
- Antes da coleta de sangue, olhe novamente e certifique-se de que a análise está agendada.
- A enfermeira deve rotular os tubos corretamente.
- O auxiliar de laboratório deve realizar corretamente todas as manipulações com o biomaterial para evitar contaminação cruzada.
- O sistema de teste deve ser de excelente qualidade.
Somente se todas essas condições forem atendidas, o erro na resposta pode ser apenas cerca de 2% dos episódios.
Duração da análise
Muitos estão interessados em saber por quanto tempo a PCR para HIV estará pronta. O diagnóstico não dura mais de 8 horas. O paciente pode receber uma resposta no dia seguinte. O teste expresso é realizado em 2 horas.
Confiabilidade de PCR
Apesar de suas muitas vantagens, a PCR não é considerada um método diagnóstico ideal. Ele é contatado casoa necessidade de obter testes de triagem para a presença de HIV no organismo.
Quando o sangue é coletado para análise?
Quanto tempo tomar PCR para HIV? Um resultado confiável já pode ser obtido ao coletar sangue 4-4 dias após a suposta infecção. Após 2 semanas, a confiabilidade para o HIV será de 98% e com um período de 5 dias - 80%. A presença de um resultado negativo na PCR para HIV será confiável, mas para um resultado absolutamente preciso, também é realizado o ELISA.
A análise ELISA só será eficaz se houver anticorpos para o vírus, este tempo pode levar de 1-3 meses a seis meses. Como o ELISA fornece uma probabilidade mais alta (98% -99,9%), a PCR não pode ser chamada de teste 100% confirmatório da presença de infecção pelo HIV. Mas por outro lado, esta é a única técnica em que você não precisa esperar pelo aparecimento de anticorpos.
Com o HIV, a PCR pode fornecer informações sobre a eficácia da TARV, o estágio da doença pelo HIV e o número de VNs (uma avaliação quantitativa da presença do HIV no organismo). Isso vai falar da gravidade e extensão da mudança.
Teste de PCR para HIV também é necessário se houver anticorpos no sangue, mas sua presença não indica clinicamente a confiabilidade da infecção pelo HIV.
Eles são testados não apenas para infecção e sexo casual. Outras ocasiões:
- Planejando a gravidez.
- Próxima operação.
- Sexo casual.
- Algumas profissões exigem este teste para admissão ao trabalho (professores, médicos e outros profissionais da área médica).
- Prisioneiros.
- pacientes com TB.
- Funcionários do Ministério de Situações de Emergência e da polícia.
- Retornou de férias de países exóticos (se você quiser ter certeza de que não há infecção).
- Prostitutas.
- Estrangeiros.
- Drogas.
Além disso, certos sintomas em um paciente podem forçar um teste de HIV:
- Perda de peso repentina.
- Diarreia com duração superior a 3 semanas
- Temperatura alta não razoável por muito tempo.
- Linfonodos inchados.
- Causa inexplicável de pneumonia, candidíase, etc.
Decifrar a análise é prerrogativa do médico assistente, não do auxiliar de laboratório.
PCR ou ELISA, qual é melhor?
Quando o diagnóstico por PCR do RNA do vírus HIV é detectado qualitativa e quantitativamente. Esta análise identifica claramente um patógeno específico, mesmo se houver vários patógenos de reação cruzada. O material biológico pode ser usado mesmo na forma seca. A desvantagem é a alta sensibilidade da PCR, quando um resultado falso positivo pode ser dado pela presença de uma pequena quantidade de DNA estranho em instrumentos ou tubo de ensaio.
A tarefa e possibilidade do ELISA é determinar a presença de anticorpos para um retrovírus. Embora sua precisão seja de 99%, não é aplicável nos estágios iniciais.
Teste de HIV Qualitativo
PCR de alta qualidade para HIV determina a presença do vírus no organismo. Os resultados neste caso serão assim: positivo, falso positivo, negativo. Mas este estudo não dará informações sobre a quantidade de retrovírus. Essa análise qualitativainapropriado quando a infecção pelo HIV já foi detectada no corpo por outros meios.
É impossível controlar a eficácia do tratamento com PCR de alta qualidade.
quantificação do HIV
Realizada apenas por pessoas infectadas pelo HIV para contar o número de cópias do RNA do vírus em um produto biológico.
O objetivo de tal estudo é monitorar o tratamento em andamento e identificar a resistência do vírus a ele. A terapia antiviral em tais cálculos não é prescrita cegamente por um médico, por isso será mais eficaz. A PCR quantitativa para infecção pelo HIV é feita com muito mais frequência. Esta análise é exibida como uma cópia/ml de sangue.
Quais resultados podem ser dados:
- RNA do vírus está ausente ou muito pequeno (cerca de 20 cópias/ml). Sem certeza do diagnóstico.
- De 20 - a 10 cópias do 6º grau / ml - o diagnóstico é confiável.
- Mais de 106 cópias/ml - VN alto.
Os laboratórios podem realizar testes de PCR em tempo real para HIV. Isso implica a observação e avaliação numérica do acúmulo de produtos de PCR com registro automático dos resultados.
